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2021-09-25 23:22:02 164

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食品亚斜枝研究与褒毒寸顾仁勇汪果利吉首大学化学化工学院食品科学与工程系湖南吉首摘要利用超临界co萃取法从丁香中提取精油研究测定了丁香精油对各种供试菌种的抑茵圈直径.加热处理及pH对丁香精油抑茵效果的影响同时研究了丁香精油的抗氧化效果结果表入党积极分子考察表目数与毫米对照表教师职称级别一览表员工考核评分表普通年金现值系数表明丁香精油对各供试菌种的抑茵圈直径在18.[卜38.2mm之间表明丁香精油对G和G一细菌霉菌和酵母均有很强的抑制作用丁香精油的抑茵效果随pH的降低而增强121℃/加热处理对丁香精油的抑茵效果无明显影响丁香精油还具有一定的抗氧化性能关键词丁香精油抑茵抗氧化天然防腐剂..ue.-died.too.ld...2mm.i.e.....中图分类号文献标识码B文章编号丁香为桃金娘科植物丁香的花蕾气微香味辛辣含淀粉及少量挥发油具有抗菌消炎抗病毒等功效⋯丁香花蕾中含有15~20g/的精油其中85%~92%为具有抗菌作用的丁香酚丁香酚成分越高抗菌能力越高『引丁香属植物全世界约有四十种分布于欧洲和亚洲我国有23种自我国东北至西南各省均有分布本研究采用超收稿日期一16作者简介顾仁勇1972一男学士副教授主要从事食品保藏的研究工作临界二氧化碳法萃取丁香精油选取食品中常见的腐败菌为对象研究丁香精油的抑菌效果.以及pH和加热处理对其抗菌效果的影响同时研究了丁香精油对油脂的抗氧化性能期望为丁香精油作为天然食品保鲜剂的开发提供相应的理论依据1材料与方法1.1材料与设备丁香新鲜猪油购于本地市场白葡萄球菌is枯草杆菌大肠杆菌黑曲霉青霉酿酒酵母iae以上菌种由吉首大学资源与环境科学学院微生物实验室提供三氯甲烷冰乙酸碘化钾硫代硫酸钠等以上药品均为分析纯半连续超临界CO2萃取装置型生化培养箱LRH一150一B电热恒温鼓风干燥箱数显恒温水浴锅HH一2电子分析天平AEL一200光学显微镜xs一213全自动立式电热压力蒸汽灭菌器YXQ一.2实验方法1.2.1丁香精油的萃取将丁香粉碎后.采用超临界CO萃取技术萃取其精油参考文献3设定萃取条件为萃取压力温度40oC萃取时间1h萃取得到的丁香精油为黄色油状液体萃取得率为20.6%1.2.2丁香精油抑菌实验1.2.2.1培养基的制备分别配置营养琼脂培养基马铃薯培养基和豆芽汁培养基待用1.2.2.2菌悬液的制备将各菌种活化制成菌悬液细菌使用平板计数法霉菌酵母使用显微镜直接记数法测菌体个数调至浓度为含菌体为106---10个/mL的菌悬液备用『41.2.2.3抑菌圈的测定滤纸片法制直径为8.5ram的圆滤纸片灭菌后放人丁香精油中浸泡2h将各种待测菌悬液各取0.15mL在相应的固体培养基上均匀涂布制成含菌平板取浸泡过精油的滤纸片贴在维普资讯讲究与探讨食品亚斜枝Vo1.2.No.表1丁香精油对供试菌的抑菌圈直径含菌平板上每皿贴3片细菌置培养箱中37℃下培养24h酵母置培养箱中28℃下培养48h霉菌置培养箱中28℃下培养1周选取抑菌圈比较明显的平板测定抑菌圈直径.结果取三次重复实验的平均值1.2.2.4pH对丁香精油抑菌效果的影响用2%的NaOH和50%的柠檬酸分别调节培养基pH为4.05.O6.O7.O8.O五个梯度.用无菌水对照进行抑菌圈的测定方法同1.2.2.3比较不同pH下丁香精油的抑菌效果1225热处理对丁香精油抑菌效果的影响I精油原液分别置于℃下热处理然后测其抑菌圈方法同1.2.2.31.2.3丁香精油的抗氧化作用实验1.2.3.1样品处理分别取精油O.251.O4.Og放人锥形瓶中每瓶加人新鲜猪油40g拌匀另外取两份40g相同的猪油.其中一份加入60mg的TBHQ作对照样另一份作空白样将各试样在70C下搅拌0.5h使加人物充分溶解用棉塞塞好置于恒温箱中65℃恒温保存每隔24h搅拌2min并交换它们在恒温箱中的位置.每3d取样测定油脂过氧化值『5j1.2.3.2过氧化值的测定按照GB/.37-2003食用植物油卫生标准的分析方法进行2结果与讨论2.1丁香精油的抑菌效果丁香精油对供试验菌种抑菌圈直径测定结果见表1抗菌素抑菌圈实验结果的判定标准是抑菌圈直径15mm为最敏感10~15mm为中度敏感7~9mm时为低度敏感无抑菌丁香精油-广州顶馨香料科技有限公司

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圈者为不敏感[61表1的测定结果显示.丁香精油对各供试菌种的抑菌圈直径处于18~38.2mm之间均属最敏感抑制效果非常明显相对比较来看.对两种霉菌及酿酒酵母抑制效果要好于细菌在具有抑菌作用的植物材料中多数是对细菌的抑制力较强而对真菌酵母及霉菌的抑制力较差丁香的突出优点是抑制真菌作用强这预示着丁香精油作为天然食品防腐剂具有独特的优势对丁香精油抑菌效果的影响以白葡萄球菌为试验对象菌不同pH下丁香精油对白葡萄球菌的抑菌圈测定结果见表2表2不同pH条件下对白葡萄球菌的抑菌圈测定结果由表2的结果可见.在pH为45时白葡萄球菌完全没有生长pH为678时随着pH的增大抑菌圈直径减小上述结果表明丁香精油的抑菌效果与pH有关在pH5时抑菌效果非常强烈pH5时.随pH的增大.抑菌效果有所减弱低pH条件下抑菌力增强可能与供试菌所处的酸性环境发生变化降低了细菌的活性有关2.3丁香精油热稳定性测定结果以白葡萄球菌为试验对象菌丁香精油分别经处理后其对白葡萄球菌的抑菌圈测定结果见表3表3不同温度处理后丁香精油对白葡萄球菌的抑菌圈直径表3的结果表明丁香精油分别经℃.处理后其对白葡萄球菌的抑菌圈直径无明显差异表明丁香精油在加热时其抑菌成分并未受到明显影响这一特性对于适应食品的热加工具有非常重要的实际意义2.4丁香精油的抗氧化效果过氧化物是油脂在自动氧化过程中所产生的中间产物长期以来国内外一直采用过氧化值作为食用油脂氧化的指标分别添加0.251.04.0g丁香精油及对照猪油样品的过氧化值POV在存放期间的变化如图存放天数d图1丁香精油添加量对抗氧化效果的影响由图l的结果可以看出在整个存放期间添加丁香精油猪油样品的过氧化值POV比对照样品空白样上升速度要慢证明精油对猪油的氧化产生了一定的抑制作用比较添加不同量丁香精油猪油样品的POV值的变化可以发现0.25g精油样品的曲线变化和空白样比较接近.抑制氧化的能力较弱.而精油添加量为1.Og和4.Og时抑制氧化的能力则明显的加强和添加TBHQ的样品相比f下转第84页一FaLu一0维普资讯食品业斜技无间歇时突变率78.6%和有间歇15s相近远远大于有间歇10s的突变率但是正突变率却相对较低结合图2图3可以看出随着微波辐射强度的增加菌株突变率也随之增加.但正突变率在上升到一定程度后又呈下降趋势微波诱变该菌株的最佳诱变剂量为低强度40s2.3高产菌株的筛选从各剂量组挑出生产能力超过10%以上的菌株进行摇瓶发酵复筛多次筛选最后选取各组生产能力相对较高菌株结果见图4最终发现编号为M314的菌株生产能力最高达到0.374相对酶活ODs比出发菌株W195的0.241提高了55%-35鲁0.300.250.100.050出发菌株诱变后各剂量组最高产量菌株无间隔菌株编号图4各组生产能力最高菌株与出发菌株的酶活对比柱状图2.4遗传稳定性实验有些经人工诱变处理得到的高产突变株遗传基因型不稳定易出现回复突变或产量下降等问题乘法口算100题七年级有理数混合运算100题计算机一级题库二元一次方程组应用题真心话大冒险刺激问题故需要验证其遗传稳定性一般连续传代多次后产量不下降的菌株遗传稳定性较好适合用于以后的生产实践将诱变得到的M314接种到斜面培养基上作为第1代以后每隔48h传代1次共传代10次然后测定第1代和第510代以及出发菌的产酶能力结果见表1可见M314各代间酶活差异不明显证明遗传性状稳定综上所述微波照射能有效改善枯草芽孢杆菌W195的产一乙酰乳酸脱羧酶能力诱变时选用微波低强度照射时间为40s对枯草芽孢杆菌w195讲究与援讨表1遗传稳定性实验结果进行诱变育种的效果最好所选育的菌株ALDC产量有很大提高且有较好的遗传稳定性3讨论微波作为一种高能电磁波能引起水蛋白质核苷酸脂肪和碳水化合物等极性分子快速转动尤其是水分子在微波作用下能在1s内来回转动2.4510次从而引起分子间强烈的摩擦使得胞内DNA分子氢键和碱基堆积化学力受损.最终引起DNA分子结构发生变化导致遗传变异另外微波具有传导作用和极强的穿透力在引起细胞壁分子间强烈震动和摩擦时改变其通透性使细胞内含物迅速向胞外渗透导致核质变换而引起突变5j微波的致突变作用是肯定的但是在实验中究竟是微波辐射直接作用于微生物DNA引起变异还是其穿透力使细胞壁通透性增加导致核质变换而引起突变.目前尚不明了有待进一步研究参考文献1]李豪车振明.微波诱变微生物育种的研究[J].山西食品工业~7.2]王志刚蒋欧时德.低强度微波辐射的细胞生物学效应[J].中华物理医学与康复杂志~438.3]凌建华吴建宇.国产Q一乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中的应用[J].江苏调味副食品-15.[4]-.[J].~965.5]郑应福阚振荣邸胜苗.仅一ALDC产生菌的抗性标记与融合条件初探[J].酿酒~59.·一---------------------一--------一-----一---上接第81页用量为4.0g精油的抗氧化效果仍低于结论丁香精油对供试的细菌酵母和霉菌的抑菌圈直径处于18~38.2mm之间具有良好的抑制效果并且对霉菌和酵母的抑制效果强于细菌丁香精油的抑菌效果随pH降低而增强丁香精油经121C/处理.对其抑菌能力无明显影响丁香精油具有一定的抗氧化能力但其抗氧化性弱于TBHQ参考文献1]吴周和徐燕吴传茂.丁香甘草与迷迭香的抑菌作用及其在酱油中的应用研究[J].中国酿造~20.2]孙卫青.几种天然香辛料抑菌性能研究[J].湖北农学院学报.2004.-209.3]江伟强伍培辉.采用超临界二氧化碳萃取天然香料[J].冷饮与速冻食品工业~35.[4]沈萍范秀容李广武.微生物学实验[M].北京高等教育出版社.1999.5]何文珊李炎李琳等.几种香辛料对油脂抗氧化效果的评价[J].中国调味品.[6李春美杜靖谢笔钧.柚皮提取物的抑茵作用J].食品与发酵工业~4l_维普资讯

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